2024-09-27
Καθορισμός της πολυαιθυλενογλυκόλης με χρωματογραφία διείσδυσης με τζελ
1Εισαγωγή
Σκοπός: Καθορισμός του μοριακού βάρους και της κατανομής της πολυαιθυλενογλυκόλης (PEG) με μέθοδο υψηλής απόδοσης χρωματογραφίας διείσδυσης με τζελ (GPC).
Μέθοδος:
Xtimate SEC-120, 5 μm, 7,8x300 mm στήλη χρωματογραφίας διείσδυσης με τζελ
Ανιχνευτής διαφορικού δείκτη κάμψης (RID)
Κινητή φάση: υπερκαθαρό νερό
Ταχύτητα ροής: 1,0 ml/min
θερμοκρασία στήλης: 35 °C·
Όγκος ένεσης: 10μl.
Καθορίζονται καμπύλες βαθμονόμησης και τα αποτελέσματα του μοριακού βάρους και της κατανομής κάθε δείγματος υπολογίζονται με λογισμικό GPC.
Αποτελέσματα: Η γραμμικότητα του PEG είναι καλή όταν το μοριακό βάρος ήταν στο εύρος 400-20000. Η αναπαραγωγικότητα του πειράματος είναι καλή, με 6 διαδοχικές ενέσεις PEG6000,η τιμή RSD του χρόνου κατακράτησης είναι 00,105%, και η τιμή RSD της περιοχής κορυφής είναι 0,335%.
Συμπέρασμα: Η χρωματογραφία διείσδυσης με τζελ υψηλών επιδόσεων (GPC) είναι αξιόπιστη μέθοδος για τον προσδιορισμό του μοριακού βάρους και της κατανομής του PEG,που έχει τα πλεονεκτήματα της ακριβούς και υψηλής αναπαραγωγικότητας όταν χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της ιδιότητας πολυδιασπαστικότητας των πολυμερών ενώσεων.
Κλειδιά λέξεων: HPLC, GPC, RID, Πολυμερές, Πολυαιθυλένιο γλυκόλη
2. Μέθοδος πειράματος
2.1 Διαμόρφωση οργάνων
Πίνακας 1 Κατάλογος διαμορφώσεων υγρών χρωματογράφων υψηλών επιδόσεων
| - Όχι, όχι. | Μονωδική | Αριθμός |
| 1 | Υψηλής απόδοσης υγρή χρωματογραφία σειράς LC3200 | 1 |
| 2 | PB3200 Δυαδική αντλία | 1 |
| 3 | RID3300 | 1 |
| 4 | CT3200 Φούρνος στήλης | 1 |
| 5 | AS3200 Αυτοδείκτης | 1 |
2.2 Προϋποθέσεις δοκιμής
Χρωματογραφική στήλη: Xtimate SEC-120,5μm,7.8x300mm
Θερμοκρασία στήλης: 35°C
Ανιχνευτής: RID
Δυνατότητα ροής: 1,0 ml/min
Κινητή φάση: νερό
Όγκος ένεσης: 10μL
2.3 Όργανο/αντιδραστήρες και καταναλωτικά
Αντιδραστήρες:
Υπερκαθαρό νερό
Πρότυπο: PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000, PEG20000
Βοηθητικό εξοπλισμό
Αναλυτικές ισορροπίες
Μονάδα εκχύλισης διαλύτη
Υπερήχθη καθαριστικό
Πειραματικά υλικά
Μεμβράνη φίλτρου: υδατική μεμβράνη φίλτρου 0,45μm
2.4 Κατάρτιση προτύπου PEG
Πιπετά 0,20g το καθένα από τα πρότυπα PEG400, PEG2000, PEG6000, PEG10000 και PEG20000, προστίθενται 10 ml νερού για διάλυση, αναμιγνύονται καλά και προετοιμάζεται η συγκέντρωση των δειγμάτων των 20 mg/ml που πρόκειται να ελεγχθούν.
3Αποτελέσματα και συζήτηση
3.1 Διαφορετικά πρότυπα μοριακού βάρους
Σχήμα 1 Χρωματογράφημα PEG400
Πίνακας 1 Χρωματογραφικές παράμετροι του PEG400
| - Όχι, όχι. | Συστατικές ουσίες | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής | Αριθμός της θρηκτικής πλάκας | Παράγοντας παρακολούθησης |
| 1 | PEG400 | 10.315 | 501.732 | 2346 | 1.185 |
Πίνακας 2 Χρωματογραφικές παραμέτρους του PEG2000
| - Όχι, όχι. | Συστατικές ουσίες | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής | Θεωρητικός αριθμός πινακίδας | Παράγοντας παρακολούθησης |
| 1 | PEG2000 | 8.659 | 499.892 | 1926 | 1.230 |
Σχήμα 3 Χρωματογράφημα PEG6000
Πίνακας 3 Χρωματογραφικές παράμετροι του PEG6000
| - Όχι, όχι. | Συστατικές ουσίες | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής | Θεωρητικός αριθμός πινακίδας | Παράγοντας παρακολούθησης |
| 1 | PEG6000 | 7.215 | 499.482 | 1.171 |
Σχήμα 4 Χρωματογράφημα PEG10000
Πίνακας 4 Χρωματογραφικές παράμετροι του PEG10000
| - Όχι, όχι. | Συστατικές ουσίες | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής | Θεωρητικός αριθμός πινακίδας | Παράγοντας παρακολούθησης |
| 1 | PEG10000 | 6.612 | 483.657 | 2550 | 1.265 |
Σχήμα 5 Χρωματογράφημα PEG20000
Πίνακας 5 Χρωματογραφικές παραμέτρους του PEG20000
| - Όχι, όχι. | Συστατικές ουσίες | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής | Θεωρητικός αριθμός πινακίδας | Παράγοντας παρακολούθησης |
| 1 | PEG20000 | 6.081 | 497.803 | 1103 | 1.799 |
Σχήμα 6 Επικάλυψη χρωματογραμμάτων διαφορετικού μοριακού βάρους
Σημείωση: Τα παραπάνω δεδομένα δείχνουν ότι ο χρόνος κατακράτησης του PEG20000 είναι 6,081 λεπτά και του PEG400 10,315 λεπτά, τα μεγαλύτερα μόρια εκχυλίζονται πρώτα και τα μικρότερα μόρια εκχυλίζονται αργότερα.
3.2 Επαναληψιμότητα
Σχήμα 7 Χρωματογράμματα επικαλύψεως επαναληψιμότητας του PEG6000 (n=6)
Πίνακας 7 Χρωματογραφικές παραμέτρους επαναληψιμότητας του PEG6000 (n=6)
| - Όχι, όχι. | Δείγματα | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής |
| 1 | 6000 | 7.233 | 498.821 |
| 2 | 6000 | 7.234 | 503.367 |
| 3 | 6000 | 7.225 | 499.891 |
| 4 | 6000 | 7.221 | 499.560 |
| 5 | 6000 | 7.219 | 501.374 |
| 6 | 6000 | 7.215 | 499.482 |
| Μέσος όρος | - | 7.225 | 500.416 |
| ΔΕΔ (%) | - | 0.105 | 0.335 |
Σημείωση: Η επαναληψιμότητα είναι καλή.
3.3 Τυπικές καμπύλες
Σχήμα 8 Τυποποιημένες καμπύλες Χρωματογράμματα διαφορετικών μοριακών βαρών
Πίνακας 8 Τυποποιημένες καμπύλες Χρωματογραφικές παράμετροι διαφόρων μοριακών βαρών
Σημείωση: Τα αποτελέσματα του μοριακού βάρους και της κατανομής κάθε δείγματος υπολογίζονται με λογισμικό GPC.000, και ο συντελεστής γραμμικής συσχέτισης είναι 0.999.
4Συμπεράσματα
Η δοκιμή αυτή της πολυαιθυλενογλυκόλης (PEG) εκτελείται με χρωματογραφία σε τζελ χρησιμοποιώντας υγρό χρωματογράφο υψηλών επιδόσεων της σειράς LC3200 με ανιχνευτή διαφορικού δείκτη διάθλασης.ο χρόνος διατήρησης του PEG20000 είναι 6Η επαναληπτικότητα είναι καλή. Ο χρόνος κατακράτησης είναι 0.105% και το RSD της περιοχής κορυφής είναι 0Η γραμμικότητα του μοριακού βάρους του PEG είναι καλή στην περιοχή 400 έως 20,000, και ο συντελεστής γραμμικής συσχέτισης είναι 0.9999Η χρωματογραφία διείσδυσης με τζελ υψηλών επιδόσεων (GPC) είναι μια αξιόπιστη μέθοδος για τον προσδιορισμό του μοριακού βάρους και της κατανομής του PEG,που έχει τα πλεονεκτήματα ακριβών και αναπαραγωγικών αποτελεσμάτων όταν χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της ιδιότητας πολυδιασπαστικότητας των πολυμερών ενώσεων.
Σημείωση: Το δείγμα πρέπει να παραμείνει σε θερμοκρασία δωματίου για περισσότερο από 12 ώρες και να αναμιγνύεται απαλά, χωρίς υπερήχους ή έντονο κούρεμα για την επιτάχυνση της διάλυσης.
Στείλτε το αίτημά σας απευθείας σε εμάς
