2024-10-22
Καθορισμός της 6-μεθυλοκουμαρίνης στα καλλυντικά με υγρή χρωματογραφία
1.1 Διαμόρφωση οργάνων
Πίνακας 1 Κατάλογος διαμορφώσεων υγρής χρωματογραφίας
| - Όχι, όχι, όχι. | Μονάδα | Αριθμός |
| 1 | PB3210 Δυαδική αντλία | 1 |
| 2 | CT3400 Φούρνος στήλης | 1 |
| 3 | AS3210 Αυτο-αποδεικτής | 1 |
| 4 | Ανιχνευτής UV3210 | 1 |
| 5 | NovaChrom SC18 4,6*250mm, 5μm | 1 |
| 6 | Εργασιακό Σταθμό SmartLab | 1 |
1.2 Μεθοδολογία πειραμάτων
1.2.1 Αντιδραστήρες
Πίνακας 2 Κατάλογος αντιδραστηρίων
| - Όχι, όχι, όχι. | Αντιδραστήρες | Καθαρότητα |
| 1 | Μεθανόλη | Χρωματογραφικός βαθμός |
| 2 | 6-μεθυλοκουμαρίνη | 99% |
| 3 | Φωσφορικό διυδρογόνο αμμωνίου | ΑΡ |
| 4 | Φωσφορικό οξύ | GR |
1.2.1.1 6-μεθυλοκουμαρίνη πρότυπο διάλυμα αποθέματος (1000 mg/l): Λαμβάνεται κατάλληλη ποσότητα 6-μεθυλοκουμαρίνης πρότυπου,διαλύεται και σταθεροποιείται ο όγκος με μεθανόλη και παρασκευάζεται σε συγκέντρωση 1000 mg/l σε τυποποιημένο βασικό διάλυμα.
1.2.1.2 6-μεθυλοκουμαρίνη, πρότυπο διάλυμα εργασίας:Πιπετήστε κατάλληλη ποσότητα τυποποιημένου διαλύματος 6-μεθυλοκουμαρίνης και αραιώστε το με μεθανόλη για να παρασκευάσετε μια σειρά καμπυλών εργασίας με συγκεντρώσεις 0.1mg/L, 0,5mg/L, 1,0mg/L, 3,0mg/L, 5,0mg/L και 10,0mg/L αντίστοιχα.
1.2.1.3 Λύσιμο θωρακιστή διυδρογόνου φωσφορικού νατρίου: Πάρτε 3,12 g διυδρογόνου φωσφορικού νατρίου, προσθέστε νερό για διάλυση και αραιώστε σε 1000 ml και ρυθμίστε το pH του φωσφορικού οξέος σε 3.5.
1.2.2 Προϋποθέσεις χρωματογραφίας
Πίνακας 3 Προϋποθέσεις χρωματογραφίας
| Στήλη χρωματογραφίας | NovaChrom SC18 4,6*250mm 5μm | ||
| Κινητή φάση | Α: Μεθανόλη, Β:Υποθετικό διάλυμα διυδρογόνου φωσφορικού νατρίου | ||
| Ποσοστό ροής | 1 ml/min | ||
| Θέρμανση στήλης | 35°C | Διάστημα κύματος | 275nm |
| Όγκος ένεσης | 10 μl | ||
Πίνακας 4 Πρόγραμμα εξάτμισης κλίσης
| Χρόνος (min) | Κινητή φάση Α | Κινητή φάση Β |
| 0 | 55 | 45 |
| 11 | 55 | 45 |
| 12 | 90 | 10 |
| 40 | 90 | 10 |
| 41 | 55 | 45 |
| 50 | 55 | 45 |
1.2.3 Προεπεξεργασία δειγμάτων
Πάρτε 1g (με ακρίβεια 0,001g) του δείγματος σε μια χωρητική φιάλη 10mL, προσθέστε 5mL μεθανόλης, στροβιλίζοντας και κουνώντας για να αναμιγνύσετε πλήρως το δείγμα με το διάλυμα εκχύλισης, εκχύλιση με υπερήχους για 20 λεπτά,ψύχεται σε θερμοκρασία δωματίου, και στη συνέχεια καθορίζεται ο όγκος σε 10 ml με μεθανόλη, αναμειγνύεται και στη συνέχεια μεταφέρεται σε φυγοκεντρικούς σωλήνες, φυγοκεντρικό σε 5000 r/min για 5 λεπτά,και το υπερκυκνωτικό φιλτράρεται μέσω του 0.45μm οργανική μεμβράνη, και στη συνέχεια να δοκιμαστεί.
2Το αποτέλεσμα του πειράματος.
2.1 Κατάλληλότητα του συστήματος
Σχήμα 1 Χρωματογράφημα προτύπων 10 mg/l
Πίνακας 5 Δεδομένα δοκιμής με πρότυπα 10 mg/l
| Συστατικές ουσίες | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής | Θεωρητικός αριθμός πινακίδας |
| 6-μεθυλοκουμαρίνη | 11.168 | 574.285 | 15854 |
Σημείωση:Το χρωματογράφημα και τα δεδομένα δείχνουν ότι η 6-μεθυλοκουμαρίνη έχει καλό σχήμα κορυφής και δεν υπάρχουν άλλες κορυφές γύρω από την κορυφή στόχου, ενώ ο θεωρητικός αριθμός πλάκων είναι υψηλός,που πληροί τις πειραματικές απαιτήσεις.
2.2 Τυποποιημένη καμπύλη
Σχήμα 2 Αποτελέσματα δοκιμής τυποποιημένης καμπύλης
Σημείωση: Το χρωματογράφημα δείχνει ότι η τιμή R του συντελεστή συσχέτισης της καμπύλης 6-μεθυλοκουμαρίνης είναι άνω του 0.9999, η οποία πληροί τις πειραματικές απαιτήσεις.
2.3 Επαναληψιμότητα
Σχήμα 3 Χρωματογράφημα επαναληψιμότητας 3 mg/ L Προτύπα 6 ενέσεων
Πίνακας 6 Δεδομένα επαναληψιμότητας 3mg/ L Προδιαγραφές 6 ενέσεωνΠίνακας 6 Δεδομένα επαναληψιμότητας 3mg/ L Προδιαγραφές 6 ενέσεωνσ
|
6-μεθυλοκουμαρίνη |
- Όχι, όχι, όχι. | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής |
| 1 | 11.159 | 177.710 | |
| 2 | 11.161 | 176.711 | |
| 3 | 11.142 | 177.128 | |
| 4 | 11.152 | 176.985 | |
| 5 | 11.150 | 177.469 | |
| 6 | 11.149 | 177.629 | |
| ΔΕΔ (%) | 0.061 | 0.222 |
Σημείωση: Σύμφωνα με τα δεδομένα του παραπάνω πίνακα, η RSD της επαναληψιμότητας χρόνου διατήρησης της 6-μεθυλοκουμαρίνης είναι 0,061%, και η RSD της επαναληψιμότητας περιοχής αιχμής είναι 0,222%.Η επαναληπτικότητα είναι καλή και πληροί τις πειραματικές απαιτήσεις.
2.4 Όριο ανίχνευσης
Σχήμα 4 Δοκιμαστικό χρωματογράφημα των προτύπων 0,02 mg/l
Πίνακας 7 Δεδομένα δοκιμής με πρότυπα 0,02 mg/l
| Συστατικές ουσίες | Χρόνος διατήρησης | Περιοχή κορυφής | ΣΕΠ |
| 6-μεθυλοκουμαρίνη | 11.153 | 1.208 | 19.296 |
Σημείωση: Σύμφωνα με τα παραπάνω δεδομένα, το όριο ανίχνευσης υπολογίζεται ως 3 φορές αναλογία σήματος-θόρυβου και διαπιστώθηκε ότι το όριο ανίχνευσης της 6-μεθυλοκουμαρίνης είναι 0,004 mg/l.Ακολουθεί τις πειραματικές απαιτήσεις..
2.5 Αποτελέσματα δοκιμής δείγματος καλλυντικού
Σχήμα 5 Χρωματογράφημα δοκιμής δείγματος καλλυντικού
Σημείωση: Η 6-μεθυλοκουμαρίνη δεν ανιχνεύθηκε σε δείγμα καλλυντικού.
2Προσοχή.
Κατά τη χρήση φυγοκέντρωσης υψηλής ταχύτητας, φροντίστε να τοποθετούνται οι σωλήνες συμμετρικά και η συνολική μάζα των σωλήνων στις αντίθετες πλευρές να είναι η ίδια.
3Συμπεράσματα
Η αναλυτική μέθοδος που εισάγεται στο παρόν άρθρο, με αναφορά στα Πρότυπα Ασφάλειας και Τεχνικών Προτύπων για τα Κοσμητικά για την ανίχνευση της 6-μεθυλοκουμαρίνης,με τη χρήση υγρής χρωματογραφίας υψηλών επιδόσεων Wayeal σειράς LC3200 με ανιχνευτή UVΤο αποτέλεσμα του πειράματος δείχνει ότι το σχήμα κορυφής της 6-μεθυλοκουμαρίνης είναι καλό στην δοκιμή προσαρμοστικότητας του συστήματος και δεν υπάρχουν άλλες κορυφές γύρω από το στόχο κορυφής,και ο θεωρητικός αριθμός πινακίδων είναι υψηλόςΗ τιμή του συντελεστή συσχέτισης καμπύλης R είναι άνω του 0.9999Το RSD της επαναληψιμότητας χρόνου διατήρησης της 6-μεθυλοκουμαρίνης είναι 0,061%, και το RSD της επαναληψιμότητας περιοχής αιχμής είναι 0,222%, γεγονός που δείχνει καλή επαναληψιμότητα..Όλα τα ανωτέρω αποτελέσματα δοκιμών πληρούν τις απαιτήσεις του οργάνου με τη τυποποιημένη μέθοδο.
Στείλτε το αίτημά σας απευθείας σε εμάς
