?
2026-10-21
Οι νιτροϊμιδαζόλες είναι συνθετικά αντιβακτηριακά και αντιπρωτοζωικά φάρμακα που αναστέλλουν αποτελεσματικά τα αναερόβια βακτήρια και τα τριχομονάδια.Κάποτε χρησιμοποιούνταν ευρέως στην κτηνοτροφία και την υδατοκαλλιέργεια για τον έλεγχο των λοιμώξεων του πεπτικού συστήματος και των πρωτόζωων.Ωστόσο, τα μητρικά φάρμακα και οι μεταβολίτες τους είναι αποδεδειγμένα τοξικά: μεταβολίζονται γρήγορα στα ζώα σε διάφορους ενεργούς μεταβολίτες,από τα οποία ορισμένα παραμένουν στον ιστό πολύ περισσότερο από την αρχική ένωση.
Τοξικολογικές μελέτες δείχνουν ότι οι μητρικές ουσίες νιτροϊμιδαζόλης και οι κύριοι μεταβολίτες τους είναι δυνητικά καρκινογόνες, μεταλλαξιογόνες και γονιδιοτοξικές.Τα υπολείμματα στα ζωικά τρόφιμα εισέρχονται στο ανθρώπινο σώμα μέσω της τροφικής αλυσίδας, και η μακροχρόνια πρόσληψη χαμηλών δόσεων μπορεί να επηρεάσει την αιματοπόηση, να βλάψει τα χρωμοσώματα και να αυξήσει τον κίνδυνο μετάλλαξης γονιδίων.και δεν επιτρέπεται κανένα κατάλοιπο σε ζωικά τρόφιμα, καθιστώντας την ακριβή δοκιμή καταλοίπων απαραίτητη για την ασφάλεια των τροφίμων.
Η GB 31658.23-2022, το εθνικό πρότυπο ασφάλειας των τροφίμων για τα υπολείμματα νιτροϊμιδαζόλης σε ζωικά τρόφιμα με υγρή χρωματογραφία και ταυτόχρονη φάσμα μαζικής, αποτελεί τη νομική βάση για την παρούσα εργασία.Καλύπτει τα μητρικά φάρμακα και τους μεταβολίτες στα βοοειδήΈνα εργαστήριο δοκιμών χρειαζόταν μια επικυρωμένη ροή εργασίας για το χοιρινό κρέας που να καλύπτει τέσσερις ουσίες-στόχους - μετρονιδαζόλη, υδροξυμετρονιδαζόλη,διμετριδαζόλη και υδροξυδιμετριδαζόλη - συμπεριλαμβανομένων των υδροξυμεταβολιτών που είναι πιο δύσκολο να διατηρηθούν και να ιονιστούν, σε επίπεδο sub-ppb, με χαμηλή μεταφορά και σταθερή ακρίβεια σε μεγάλες ακολουθίες ένεσης.
| Άρθρο | Διαμόρφωση |
|---|---|
| Σύστημα LC-MS/MS | Wanyi LCMS-TQ9200 τριπλός τετραπόλος |
| Αναλυτική στήλη | C18, 1,6 μm, 2,1 x 100 mm |
| Κινητή φάση Α | 00,1% μυρμηκικό οξύ σε νερό |
| Κινητή φάση Β | 00,1% μυρμηκικό οξύ σε ακετονιτρίλιο |
| Ποσοστό ροής | 00,3 ml/min |
| Θέρμανση στήλης | 40 βαθμοί C |
| Όγκος ένεσης | 4 Λ |
| Βοηθητικό εξοπλισμό | Υπερηχητικό μπάνιο, αναμεικτικό δίνης, φυγοκέντρωση υψηλής ταχύτητας, νερό μπάνιο, ατμιστήρας αζώτου, αναλυτική ζυγαριά |
Ζυγίζει 2 g δείγματος (με ακρίβεια 0,05 g) σε φυγοκεντρωτή σωλήνα 50 ml, προσθέτει 10 IU 1 μg/ml μικτού εσωτερικού τυποποιημένου εργασιακού διαλύματος, περιστρέφεται για 30 δευτερόλεπτα και αναπαύεται για 10 λεπτά. Προσθέτει 15 ml αιθυλοακετάτη,στρόβιλο για 2 λεπτά και φυγοκέντρωση σε 10,000 στροφές/min για 5 λεπτά. Μεταφέρετε το υπερκυκλωτικό και επαναλάβετε την εξαγωγή μία φορά με επιπλέον 15 ml αιθυλοακετάτη.Συνδυάστε και τα δύο εκχυλίσματα και εξατμίστε μέχρι ξηρότητας κάτω από άζωτο σε ένα μπάνιο νερού 25 βαθμών C.
Το κατάλοιπο διαλύεται σε 5 ml υδροχλωρικού οξέος 0,1 mol/l, περιστρέφεται για 1 λεπτό, προστίθενται 5 ml n-εξάνης, ανακινείται για 1 λεπτό και φυγοκεντρώνεται με 5.000 στροφές ανά λεπτό για 5 λεπτά.Απορρίπτεται το στρώμα εξάνου και επαναλαμβάνεται το βήμα απολιπαρίσματος μία φορά με άλλα 5 ml εξάνου..Κατασκευάστε ένα φυσίγγιο εκχύλισης στερεής φάσης με 3 ml υδροχλωρικού οξέος 0,1 mol/l και 3 ml μεθανόλης, φορτώστε το υδατικό στρώμα, πλύνετε με 3 ml 0.1 mol/l υδροχλωρικού οξέος και ελουτίωση με 4 ml μεθανόληςΤο ελαθείο εξατμίζεται μέχρι ξηρότητας στους 35 βαθμούς Κελσίου κάτω από άζωτο, ανασύρεται σε 0,5 ml νερού, περιστρέφεται για 1 λεπτό και φιλτράρεται πριν από την ένεση.
| Παράμετρος | Αποτελέσματα |
|---|---|
| Χρόνος λειτουργίας | Τέσσερα αναλυτές συν εσωτερικά πρότυπα διαχωρισμένα μέσα σε 8 λεπτά, συμμετρικές κορυφές, ισχυρή ανταπόκριση |
| Γραμμικότητα | Ταυτοποίηση με βάση τη μήτρα σε 2, 4, 20, 40, 200 και 400 ug/l· R2 άνω των 0,9995 για όλες τις τέσσερις ενώσεις, απόκλιση κάτω από το όριο του 20% |
| Τοποθεσία εκμετάλλευσης | Σημείο-θόρυβος άνω των 3 σε 0,5 μg/kg και άνω των 10 σε 1 μg/kg, που πληρούν τις απαιτήσεις LOD 0,5 μg/kg και LOQ 1 μg/kg |
| Ακριβότητα (n = 6) | Η RSD κάτω από 6% σε 2 ng/mL και κάτω από 3% σε 20 ng/mL, έναντι ορίου 10% |
| Μεταφορά | Η ενέσιμη ουσία σε κενό μετά το ανώτατο πρότυπο των 400 ng/mL πολύ κάτω από το 20% της περιοχής αιχμής LOQ |
| Ανάκαμψη της κορυφής | 610,8% έως 103,35% σε 2 ng/mL και 104,35% έως 107,15% σε 20 ng/mL, εντός της απαίτησης 60% έως 120% |
| Πραγματικό δείγμα χοιρινού κρέατος | Καμία από τις τέσσερις νιτροϊμιδαζόλες δεν ανιχνεύθηκε |
Η βαθμονόμηση με βάση τη συστοιχία σε κενό εκχύλισμα χοιρινού αντισταθμίζει την καταστολή ιόντων από τη συστοιχία κρέατος και διατηρεί την αξιόπιστη ποσοτικοποίηση σε επίπεδο ίχνη.για την επιβεβαίωση ότι η εκχύλιση αιθυλοακετάτη, αποτρίχωση εξάνου και καθαρισμός SPE αφαιρούν τις παρεμβολές σε 1 μg/kg.
Το σύστημα Wanyi LCMS-TQ9200 LC-MS/MS παρείχε επικυρωμένη μέθοδο για τέσσερα υπολείμματα νιτροϊμιδαζόλης στο χοιρινό σύμφωνα με την GB 31658.23-2022.9995, ακρίβεια εντός 10%,αμελητέα μεταφορά και ανάκτηση εντός του 60% έως 120% αποδεικνύουν ότι η ροή εργασίας πληροί τις συνήθεις ποιοτικές και ποσοτικές απαιτήσεις για τον έλεγχο και την επιβεβαίωση απαγορευμένων κτηνιατρικών φαρμάκων, και παρέχει μια αξιόπιστη τεχνική βάση για την παρακολούθηση των κινδύνων για την ασφάλεια των τροφίμων.
- Η απόκτηση τριπλής τετραπολικής MRM παρέχει την επιλεκτικότητα που απαιτείται για την επιβεβαίωση των απαγορευμένων υπολειμμάτων σε 0,5 μg/kg σε μια μήτρα λιπαρού κρέατος.
- Η χημεία Sub-2 um C18 σε στήλη 2,1 mm σε 0,3 ml/min διαλύει τέσσερα αναλυτικά σε λιγότερο από 8 λεπτά, με χαμηλή κατανάλωση διαλύτη.
- Τα εσωτερικά πρότυπα με σήμανση ισότοπων διορθώνουν τις απώλειες ανάκτησης κατά την εξαγωγή και το SPE, σταθεροποιώντας τα αποτελέσματα σε όλες τις παρτίδες.
- Η απολύμανση με εξάνιο πριν από το SPE προστατεύει το φυσίγγιο και την αναλυτική στήλη, παρατείνοντας τη διάρκεια ζωής σε εργαστήρια υπολειμμάτων υψηλής απόδοσης.
