Καθορισμός επτά παραβενών στα τρόφιμα με υγρή χρωματογραφία

Τα parabens (p-υδροξυβενζοϊκά), ως μια κατηγορία εξαιρετικά αποτελεσματικών και ευρέος φάσματος συντηρητικών, χρησιμοποιούνται ευρέως στους τομείς των τροφίμων (όπως σάλτσα σόγιας, ξύδι, ποτά, μαρμελάδα κ.λπ.), των καλλυντικών και των φαρμακευτικών προϊόντων. Η αντιβακτηριακή τους αποτελεσματικότητα και η ασφάλεια επηρεάζουν άμεσα τη σταθερότητα των προϊόντων και την υγεία των καταναλωτών. Αυτό το πείραμα αναφέρεται στο "GB 5009.31-2025 Εθνικό Πρότυπο Ασφάλειας Τροφίμων — Προσδιορισμός Parabens στα Τρόφιμα", χρησιμοποιώντας το σύστημα χρωματογραφίας υγρών υψηλής απόδοσης Wayeal LC3500 series, εξοπλισμένο με ανιχνευτή DAD για ανάλυση.

Λέξεις-κλειδιά: πρόσθετα τροφίμων; parabens; p-υδροξυβενζοϊκά; χρωματογραφία υγρών υψηλής απόδοσης.

1. Όργανα και Αντιδραστήρια

1.1 Λίστα διαμόρφωσης χρωματογραφίας υγρών υψηλής απόδοσης

Πίνακας 1 Λίστα πινάκων διαμόρφωσης οργάνων

Πίνακας 2 Λίστα πινάκων αντιδραστηρίων και προτύπων

Αρ.

Αναλυτικός Ζυγός

Υπερηχητικός Καθαριστής

Αναμίκτης Vortex

2. Μέθοδος Πειράματος

2.1 Προετοιμασία Αντιδραστηρίων

2.1.1 Μικτό πρότυπο διάλυμα εργασίας ενώσεων paraben: Πιπέτουμε κατάλληλα το μικτό πρότυπο ενώσεων paraben και το αραιώνουμε με 30% μεθανόλη-νερό για να προετοιμάσουμε μικτά πρότυπα διαλύματα εργασίας με μαζικές συγκεντρώσεις 0,2mg/L, 0,5mg/L, 1,0mg/L, 2,0mg/L, 5,0mg/L, 10mg/L, 20mg/L και 50mg/L, αντίστοιχα.

2.1.2 Προεπεξεργασία δείγματος:

Ζυγίζουμε 5g (με ακρίβεια 0,01g) του δείγματος σε ένα αποφοίτητο σωλήνα φυγόκεντρησης 50mL (τα ανθρακούχα ποτά απαιτούν υπερηχητική απομάκρυνση αερίων σε υπερηχητικό καθαριστή για 10 λεπτά πριν από τη ζύγιση). Προσθέτουμε 30mL διαλύματος μεθανόλης-νερού (3+7), αναδεύουμε με vortex για 3 λεπτά και υπερηχούμε για 20 λεπτά. Στη συνέχεια, προσθέτουμε διάλυμα μεθανόλης-νερού (3+7) για να φέρουμε τον συνολικό όγκο στα 40mL. Φυγοκεντρούμε στα 6000r/min για 3 λεπτά, φιλτράρουμε το υπερκείμενο και λαμβάνουμε το διήθημα για καθαρισμό. Ενεργοποιούμε τη στήλη εκχύλισης στερεάς φάσης (SPE) διαδοχικά με 5mL μεθανόλης και 5mL νερού. Μεταφέρουμε το διάλυμα που πρόκειται να καθαριστεί στη στήλη SPE που έχει ενεργοποιηθεί. Ξεπλένουμε τη στήλη διαδοχικά με 5mL νερού και 5mL διαλύματος μεθανόλης-νερού (3+7), στη συνέχεια εκλούουμε με 6mL μεθανόλης. Συλλέγουμε το εκλούσμα, το αραιώνουμε σε 10mL με νερό, το φιλτράρουμε μέσω μεμβράνης και το εγχύουμε στον χρωματογράφο υγρών υψηλής απόδοσης για ανάλυση.

3. Αποτέλεσμα Πειράματος

3.1 Δοκιμή καταλληλότητας συστήματος

Εικ. 1 Χρωματογράφημα του τυπικού διαλύματος εργασίας για ενώσεις Paraben

Πίνακας 3 Αποτέλεσμα δοκιμής του τυπικού διαλύματος εργασίας ένωσης Paraben

Ενώσεις

3.2 Δοκιμή επαναληψιμότητας

Εικ. 2 Χρωματογράφημα δοκιμής επαναληψιμότητας 1,0mg/L ένωσης Paraben (6 εγχύσεις)

Πίνακας 4 Αποτέλεσμα δοκιμής επαναληψιμότητας 1,0mg/L ένωσης Paraben (6 εγχύσεις)

Ενώσεις

3.3 Γραμμική δοκιμή

Εικ. 3 Χρωματογράφημα δοκιμής καμπύλης προτύπου

Η δοκιμή γραμμικότητας δείχνει ότι εντός της περιοχής 0,2–50mg/L, οι μικτές τυπικές καμπύλες για τις επτά ενώσεις paraben παρουσιάζουν όλες συντελεστές γραμμικής συσχέτισης μεγαλύτερους από 0,9999, υποδεικνύοντας εξαιρετική γραμμικότητα.

3.4 Δοκιμή ακρίβειας

Εικ. 4 Χρωματογράφημα δοκιμής ακρίβειας

Πίνακας 5 Αποτελέσματα δοκιμής ακρίβειας ενώσεων Paraben

Ένωση

3.5 Δοκιμή ποτού μάρκας Α

Εικ. 5 Χρωματογράφημα δοκιμής ποτού μάρκας Α

Η δοκιμή δείγματος έδειξε ότι οι επτά ενώσεις paraben δεν ανιχνεύθηκαν στο ποτό μιας συγκεκριμένης μάρκας.

4. Συμπέρασμα

Αυτό το πείραμα αναφέρεται στο "GB 5009.31-2025 Εθνικό Πρότυπο Ασφάλειας Τροφίμων — Προσδιορισμός Parabens στα Τρόφιμα", χρησιμοποιώντας το σύστημα χρωματογραφίας υγρών υψηλής απόδοσης Wayeal LC3500 series, εξοπλισμένο με ανιχνευτή DAD για ανάλυση. Τα πειραματικά αποτελέσματα δείχνουν ότι στη δοκιμή καταλληλότητας του συστήματος, κάθε κορυφή ένωσης παρουσιάζει καλό σχήμα και υψηλούς αριθμούς θεωρητικών πλακών, πληρώντας τις πειραματικές απαιτήσεις. Έξι συνεχόμενες εγχύσεις του τυπικού διαλύματος εργασίας paraben 1,0 mg/L έδειξαν επαναληψιμότητα χρόνου κατακράτησης κάτω από 0,2% και επαναληψιμότητα περιοχής κορυφής κάτω από 1,0%, υποδεικνύοντας καλή επαναληψιμότητα. Εντός της περιοχής 0,2–50 mg/L, οι συντελεστές γραμμικής συσχέτισης υπερβαίνουν όλους το 0,9999, υποδεικνύοντας καλή γραμμικότητα. Οι ανακτήσεις των επτά ενώσεων paraben στα προστιθέμενα δείγματα κυμάνθηκαν από 97,6% έως 104,8%, υποδεικνύοντας καλή ακρίβεια. Οι ανακτήσεις των επτά ενώσεων paraben στα προστιθέμενα δείγματα κυμάνθηκαν από 97,6% έως 104,8%, αποδεικνύοντας καλή ακρίβεια. Οι επτά ενώσεις paraben δεν ανιχνεύθηκαν στις δοκιμές δειγμάτων. Όλα τα παραπάνω δεδομένα πληρούν τις απαιτήσεις για το όργανο όπως ορίζεται στην τυπική μέθοδο.