Καθορισμός υπολειμμάτων αντιβιοτικών χινόλων στο κρέας κοτόπουλου με το σύστημα LCMS-TQ9200 υγρής χρωματογραφίας και φάσμαμασίας (LC-MS/MS) της Wayeal
China's National Food Safety Standard "GB 31650-2019 Maximum Residue Limits for Veterinary Drugs in Foods" specifies the maximum residue limits (MRLs) of certain quinolone antibiotics in animal-derived food productsΕπιπλέον, "GB 31658.17-2021 Εθνικό Πρότυπο Ασφάλειας Τροφίμων - Καθορισμός των Τετρακυκλινών, Sulfonamides and Quinolones Residues in Foods of Animal Origin by Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry" specifies the LC-MS/MS analytical method and corresponding limits of quantification (LOQs) for 13 quinolone antibiotics. This application note presents the successfully validated results for the analysis of 13 quinolone antibiotic residues in chicken meat using Wayeal's LCMS-TQ9200 triple quadrupole liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) system.
Κλειδιά:Ασφάλεια των τροφίμων
Συστήματα φασματομετρίας μάζας υγρής χρωματογραφίας-ταντέμ Wayeal LCMS-TQ9200
Μέθοδος υγρής χρωματογραφίας
Στήλη χρωματογραφίας: C18 3,0x100 mm
Κινητή φάση: Α: 0,1% μεθανόλη μυρμηκικού οξέος, Β: 0,1% διάλυμα μυρμηκικού οξέος
Ταχύτητα ροής: 0,4 ml/min
Θέρμανση στη στήλη: 45°C
Όγκος ένεσης: 3μL
Μέθοδος Φασματομετρίας Μάζας
Πίνακας 1 Παραμέτρους πηγής ιόντων φασματομετρίας μάζας
| Πηγή ιόντων |
ESI, κατάσταση θετικών ιόντων |
| Η τάση της πηγής ιόντων |
5500V |
| Δυνατότητα ροής αερίου απολύσεως |
18000 mL/min |
| Δυνατότητα ροής αερίου από νεφελωτήρα |
2000 ml/min |
| Δείκτης ροής αερίου |
5000 ml/min |
| Δυνατότητα ροής αερίου από σύγκρουση |
800 μl/min |
| Θερμοκρασία διάλυσης |
450°C |
| Θέρμανση αερίου σκηνής |
150°C |
Πίνακας 2 Παραμέτρους φασματομετρίας μάζας για κάθε ένωση
| Συστατικές ουσίες |
Τ1 |
Τρίτο τρίμηνο |
Δυναμικό αποκλαστοποίησης (V) |
Ενέργεια σύγκρουσης (V) |
| Οξολινικό οξύ |
262.1 |
244* |
100 |
25 |
| 160 |
100 |
50 |
| Φλουμεκίνη |
262.1 |
202 |
115 |
44 |
| 244.1* |
115 |
24 |
| Norfloxacin |
320.1 |
302.1* |
90 |
27 |
| 233.2 |
90 |
33 |
| Ενοξασίνη |
321.2 |
234 |
100 |
38 |
| 303* |
100 |
30 |
| Σιπροφλοξασίνη |
332.2 |
231 |
100 |
49 |
| 288 |
100 |
25 |
| Πεφλοξασίνη |
334.1 |
316* |
110 |
29 |
| 233.2 |
110 |
35 |
| Λομεφλοξασίνη |
352.1 |
265.1* |
110 |
31 |
| 334 |
110 |
29 |
| Δανοφλοξασίνη |
358.1 |
340.1* |
100 |
32 |
| 283.1 |
100 |
32 |
| Ενροφλοξασίνη |
360.2 |
316.1 |
110 |
27 |
| 245.1* |
110 |
38 |
| Ofloxacin |
362.1 |
318.3 |
75 |
25 |
| 261.2* |
75 |
34 |
| Μαρβοφλοξασίνη |
363.2 |
72.1* |
100 |
25 |
| 345.2 |
100 |
29 |
| Σαραφλοξασίνη |
386.1 |
299.1* |
110 |
38 |
| 342 |
110 |
27 |
| Διφλοξασίνη |
400.2 |
299.1 |
110 |
38 |
| 382.2 |
120 |
30 |
Σημείωση: Το ιόν με * είναι το ποσοτικό ιόν
1Το αποτέλεσμα του πειράματος.
1.1 Σχήμα κορυφής
Ο προσδιορισμός 13 αντιβιοτικών κινολών ολοκληρώθηκε μέσα σε 11 λεπτά.Όλες οι ενώσεις έδειξαν ισχυρή ανταπόκριση σήματος, πληρώντας τις απαιτήσεις για πειραματική ποσοτικοποίηση.
Σχήμα 1 Χρωματογράφημα 13 Χινολονών Αντιβιοτικά
1.2. Ακτίνο του αεροπλάνου
Μια κατάλληλη ποσότητα τυποποιημένου διαλύματος χινόλωνης αναμειγνύθηκε κατά σειρά για την παρασκευή προτύπων βαθμονόμησης που καλύπτουν συγκεντρώσεις από 2 έως 500 ng/mL.Η αξιολόγηση της γραμμικότητας έδειξε εξαιρετική συμφωνία με τις ονομαστικές συγκεντρώσειςΟ συντελεστής προσδιορισμού (R2) κυμαίνεται από 0,9921 έως 0.9998, επιβεβαιώνοντας την ικανοποιητική γραμμικότητα για όλα τα συστατικά.
Πίνακας 3 Πίνακας γραμμικού εύρους
| Συστατικές ουσίες |
Γραμμικό εύρος |
Λεωνικός συντελεστής συσχέτισης R2 |
| Οξολινικό οξύ |
2-500ng/ml |
0.9989 |
| Φλουμεκίνη |
2-500ng/ml |
0.9988 |
| Norfloxacin |
2-500ng/ml |
0.9968 |
| Ενοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9989 |
| Σιπροφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9982 |
| Πεφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9992 |
| Λομεφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9921 |
| Δανοφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9969 |
| Ενροφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9998 |
| Ofloxacin |
2-500ng/ml |
0.9941 |
| Μαρβοφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9997 |
| Σαραφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9946 |
| Διφλοξασίνη |
2-500ng/ml |
0.9973 |
Σχήμα 2 Λεμεδικά αποτελέσματα για επιλεγμένα αντιβιοτικά χινόλων
1.3Όριο ανίχνευσης (LOD) και όριο ποσοτικοποίησης (LOQ)
Το Εθνικό Πρότυπο Ασφάλειας Τροφίμων GB 31658.17-2021 καθορίζει όριο ανίχνευσης (MDL) 2μg/kg και όριο ποσοτικοποίησης (MQL) 10μg/kg.όλες οι ουσίες-στόχοι έχουν δείξει αναλογία σήματος-θόρυβου σημαντικά μεγαλύτερη από 3 σε 2μg/kg και 10 σε 10μg/kg, με πλήρη συμμόρφωση με τις απαιτήσεις ευαισθησίας που καθορίζονται στο εθνικό πρότυπο.
Πίνακας 4 Σχέσεις σήματος προς θόρυβο για τα όρια ανίχνευσης και ποσοτικοποίησης των ουσιών-στόχων
| Συνδυασμός |
ΣΔΣ (Σ/Ν) |
| 2μg/kg |
10 μg/kg |
| Οξολινικό οξύ |
111.26 |
359.11 |
| Φλουμεκίνη |
59.64 |
244.73 |
| Norfloxacin |
70.16 |
392.57 |
| Ενοξασίνη |
23.74 |
80.26 |
| Σιπροφλοξασίνη |
37.91 |
99.26 |
| Πεφλοξασίνη |
28.70 |
125.81 |
| Λομεφλοξασίνη |
48.54 |
165.84 |
| Δανοφλοξασίνη |
105.74 |
348.10 |
| Ενροφλοξασίνη |
35.97 |
120.82 |
| Ofloxacin |
51.67 |
287.26 |
| Μαρβοφλοξασίνη |
190.11 |
399.38 |
| Σαραφλοξασίνη |
38.11 |
160.79 |
| Διφλοξασίνη |
25.85 |
149.29 |
Σχήμα 3 Χρωματογράμματα LOD/LOQ για επιλεγμένες κινολόνες
1.4. Δοκιμές ακρίβειας
Έγινε ένεση 6 φορές ενός μικτού τυποποιημένου διαλύματος αντιβιοτικών κινολώνων σε τρεις συγκεντρώσεις (10, 50 και 100 ng/ ml) για να συγκριθεί ο χρόνος κατακράτησης και οι διακυμάνσεις της περιοχής αιχμής.Όπως φαίνεται στον παρακάτω πίνακα, όλες οι δοκιμασμένες ουσίες χινόλων έδειξαν αποκλίσεις χρόνου κατακράτησης μικρότερες από 0, 3% και αποκλίσεις περιοχής κορυφής μικρότερες από 5%,με πλήρη συμμόρφωση με την εθνική πρότυπη απαίτηση RSD ≤ 15% για την ακρίβεια.
Πίνακας 5 Δοκιμές ακρίβειας διαφόρων ενώσεων
Σχήμα 4 Χρωματογράμματα ακριβείας επιλεγμένων ενώσεων
2Συμπεράσματα
Η μέθοδος αυτή χρησιμοποίησε το σύστημα υγρής χρωματογραφίας-ταλαντέμ μαζικής φασματομετρίας Wayeal LCMS TQ9200 για τον προσδιορισμό των αντιβιοτικών χινόλων σε δείγματα κοτόπουλου.Τα πειραματικά δεδομένα έδειξαν εξαιρετικές χρωματογραφικές επιδόσεις με καλά καθορισμένα σχήματα κορυφών και απουσία ουράς για όλα τα αναλυτικάΗ μέθοδος παρουσίασε καλή γραμμικότητα με συντελεστές συσχέτισης (R2) που υπερβαίνουν το 0,99 για όλες τις καμπύλες βαθμονόμησης,μαζί με εξαιρετική αναπαραγωγικότητα, όπως αποδεικνύεται από τις αποκλίσεις χρόνου διατήρησης κάτω από 0Η ανάλυση τριών παρτίδων δειγμάτων κοτόπουλου που παρασκευάστηκαν ανεξάρτητα δεν έδειξε ανιχνεύσιμα υπολείμματα των αντιβιοτικών κινολών. These results confirm that the analytical method coupled with the Wayeal LC-MS/MS system is fully capable of meeting routine qualitative and quantitative detection requirements for the target analytes in test samples.
Το μήνυμά σας πρέπει να αποτελείται από 20-3.000 χαρακτήρες!
