|
Αρ.
|
Αντιδραστήρια και Πρότυπα
|
Καθαρότητα
|
|
1
|
Ακετονιτρίλιο
|
HPLC Grade
|
|
2
|
Τριφθοροοξικό οξύ
|
AR
|
|
3
|
Δωδεκυλοθειικό νάτριο
|
AR
|
|
4
|
N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνη
|
98.9%
|
1.3 Πειραματικά Υλικά και Βοηθητικός Εξοπλισμός
Υπερηχητικό καθαριστικό
Αναμίκτης Vortex
2. Μέθοδος Πειράματος
2.1 Παρασκευή Διαλύματος
2.1.1 Υδατικό Διάλυμα Δωδεκυλοθειικού Νατρίου (SDS): Ζυγίστε 0,865g δωδεκυλοθειικού νατρίου και προσθέστε 0,5mL τριφθοροοξικού οξέος. Αραιώστε σε 1000mL με νερό και ανακατέψτε καλά μέχρι την πλήρη διάλυση.
2.1.2 Διαλύτης: Ίδιο με την κινητή φάση (Μετρήστε με ακρίβεια 570mL υδατικού διαλύματος δωδεκυλοθειικού νατρίου και 430mL ακετονιτριλίου, ανακατέψτε καλά και έτοιμο για χρήση).
2.1.3 Γραμμικό Διάλυμα: Ζυγίστε με ακρίβεια μια κατάλληλη ποσότητα προτύπου αναφοράς N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης και διαλύστε και αραιώστε με την κινητή φάση για να λάβετε ένα διάλυμα που περιέχει περίπου 0,8μg/mL ως το τυπικό διάλυμα αποθήκευσης. Στη συνέχεια, πιπέτε με ακρίβεια 1,0mL, 1,5mL, 2,0mL, 4,0mL και 10,0mL του τυπικού διαλύματος αποθήκευσης σε πέντε ξεχωριστούς ογκομετρικούς φιάλες των 100mL. Αραιώστε στον όγκο με την κινητή φάση και ανακατέψτε καλά για να προετοιμάσετε τυπικές σειρές καμπυλών εργασίας με συγκεντρώσεις 8ng/mL, 12ng/mL, 16ng/mL, 32ng/mL και 80ng/mL.
2.1.4 Διάλυμα Προτύπου Αναφοράς: Ζυγίστε με ακρίβεια μια κατάλληλη ποσότητα προτύπου αναφοράς N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης, διαλύστε και αραιώστε με την κινητή φάση για να προετοιμάσετε ένα διάλυμα που περιέχει περίπου 16ng/mL N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης, ως το διάλυμα προτύπου αναφοράς.
2.2 Προετοιμασία Δείγματος
2.2.1 Διάλυμα Δείγματος
Πιπέτε με ακρίβεια μια κατάλληλη ποσότητα API δεσλοραταδίνης, διαλύστε και αραιώστε με την κινητή φάση για να προετοιμάσετε ένα διάλυμα που περιέχει περίπου 0,2mg/mL δεσλοραταδίνης, ως το διάλυμα δείγματος.
2.2.2 Διάλυμα Ακρίβειας
Ζυγίστε περίπου 20mg API δεσλοραταδίνης σε μια ογκομετρική φιάλη 100mL. Προσθέστε έναν κατάλληλο όγκο διαλύματος προτύπου αναφοράς N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης, διαλύστε και αραιώστε στον όγκο με την κινητή φάση για να προετοιμάσετε ένα δείγμα 100%. Ανακατέψτε καλά για να λάβετε το διάλυμα ακρίβειας.
3. Αποτέλεσμα Πειράματος
3.1 Ειδικότητα
Εικ. 2 Χρωματογράφημα Δοκιμής Ειδικότητας
Σημείωση: Ο διαλύτης δεν παρεμβαίνει στην ανίχνευση της N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης και άλλες κορυφές προσμείξεων στο διάλυμα δοκιμής επίσης δεν παρεμβαίνουν στον προσδιορισμό της προσμείξεως N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης.
3.2 Γραμμική Δοκιμή
Εικ. 3 Χρωματογράφημα Επικάλυψης για τη Δοκιμή Προσμείξεων N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης
Εικ. 4 Τυπική Καμπύλη για τις Προσμείξεις N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης
Σημείωση: Τα πειραματικά αποτελέσματα δείχνουν ότι ο συντελεστής γραμμικής συσχέτισης (R) για τη δοκιμή προσμείξεων N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης υπερβαίνει το 0,999, πληρώντας τις απαιτήσεις της δοκιμής.
3.3 Δοκιμή Επαναληψιμότητας
Εικ. 5 Χρωματογραφήματα Επαναληψιμότητας των 16 ng/mL Προτύπου (6 Εγχύσεις)
Πίνακας 3 Δεδομένα Δοκιμής Επαναληψιμότητας για το Πρότυπο των 16 ng/mL (6 Εγχύσεις)
|
Ένωση
|
Χρόνος κατακράτησης (λεπτά)
|
|
N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνη
|
15.426
|
|
15.432
|
|
15.414
|
|
15.416
|
|
15.432
|
|
15.417
|
|
Μέσος όρος
|
15.421
|
|
RSD (%)
|
0.045
|
Σημείωση: Βάσει των δεδομένων από τον παραπάνω πίνακα, η επαναληψιμότητα του χρόνου κατακράτησης για την N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνη είναι 0,045% και η επαναληψιμότητα της περιοχής κορυφής είναι 2,043%, υποδεικνύοντας καλή επαναληψιμότητα.
3.4 Δοκιμή Ακρίβειας
Εικ. 6 Χρωματογράφημα Επικάλυψης Ακρίβειας για το API Δεσλοραταδίνης
Πίνακας 4 Ακρίβεια του API Δεσλοραταδίνης (N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνη)
|
Επίπεδο
|
Γνωστή τιμή (ng)
|
Εμπλουτισμένο (ng)
|
Μετρημένη τιμή (ng)
|
Ανάκτηση (%)
|
Μέσος όρος (%)
|
|
100%
|
0.00
|
1611.52
|
1656.365
|
99.690
|
100.11
|
|
100%
|
0.00
|
1610.546
|
96.932
|
|
100%
|
0.00
|
1686.721
|
101.517
|
|
100%
|
0.00
|
1704.476
|
102.585
|
|
100%
|
0.00
|
1615.701
|
97.242
|
|
100%
|
0.00
|
1706.194
|
102.689
|
Σημείωση: Το ποσοστό ανάκτησης της N-νιτροζο-δεσλοραταδίνης σε έξι δείγματα κυμάνθηκε από 97,24% έως 102,69%, με RSD 2,58%. Αυτά τα αποτελέσματα δείχνουν ότι η μέθοδος επιτυγχάνει εξαιρετική ακρίβεια και επαναληψιμότητα για την ανίχνευση αυτής της προσμείξεως.
3.5 Δοκιμή Ορίου Ανίχνευσης (LOD)
Εικ. 7 Χρωματογράφημα του Προτύπου Αναφοράς N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης στα 8ng/mL
Πίνακας 5 Δεδομένα Δοκιμής για το Πρότυπο Αναφοράς N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης στα 8ng/mL
|
Ένωση
|
Χρόνος κατακράτησης (λεπτά)
|
Περιοχή κορυφής (mAU*s)
|
SNR
|
|
N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνη
|
15.434
|
1.213
|
30.042
|
Σημείωση: Βάσει των δεδομένων δοκιμής για το πρότυπο αναφοράς N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης στα 8ng/mL στον παραπάνω πίνακα, το θεωρητικό όριο ανίχνευσης (LOD) που υπολογίζεται χρησιμοποιώντας την αναλογία σήματος προς θόρυβο 3 φορές είναι 0,7989ng/mL.
3.6 Δοκιμή Πρώτης Ύλης για έναν Συγκεκριμένο Κατασκευαστή
Εικ. 8 Χρωματογράφημα Δοκιμής API για έναν Συγκεκριμένο Κατασκευαστή
Σημείωση: Δεν ανιχνεύθηκε N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνη στο API.
4. Συμπέρασμα
Πραγματοποιήθηκε μια μελέτη σχετικά με την προσμείξη νιτροζαμίνης N-Νιτροζο-Δεσλοραταδίνης στο Δραστικό Φαρμακευτικό Συστατικό (API) της Δεσλοραταδίνης, βάσει του πρόσφατα εκδοθέντος εγγράφου καθοδήγησης της FDA σχετικά με τον καθορισμό των αποδεκτών ορίων πρόσληψης για τις Προσμείξεις που Σχετίζονται με την Ουσία του Φαρμάκου Νιτροζαμίνης (NDSRIs). Σύμφωνα με το έγγραφο, η τιμή Αποδεκτής Πρόσληψης (AI) ορίζεται στα 400ng/ημέρα. Σε συνδυασμό με τη μέγιστη ημερήσια δόση του προϊόντος (5mg), το όριο ελέγχου στο API δεν πρέπει να υπερβαίνει τα 80ppm. Η μεθοδολογική επικύρωση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας το σύστημα Υγρής Χρωματογραφίας Υψηλής Απόδοσης (HPLC) της Wayeal, σειράς LC3400, εξοπλισμένο με ανιχνευτή υπεριώδους (UV). Η επικυρωμένη αναλυτική μέθοδος εφαρμόστηκε για τη δοκιμή των δειγμάτων του δραστικού φαρμακευτικού συστατικού και δεν ανιχνεύθηκε προσμείξη νιτροζαμίνης (N-νιτροζο-δεσλοραταδίνη). Όλα τα παραπάνω δεδομένα πληρούν τις απαιτήσεις της φαρμακοποιίας για τα όργανα.
Το μήνυμά σας πρέπει να αποτελείται από 20-3.000 χαρακτήρες!
